JAK2基因突变和CMPD的关系

血液病研究所

	JAK2基因突变和CMPD的关系 1960年，费城染色体Ph的发现使CML成为第一个具有特异遗传学标记的恶性肿瘤，并明确了染色体易位，即t(9;22)(q34;q11)，随后又进一步阐明由于染色体易位形成了BCR-ABL融合基因，成为其特征性的分子学标志。这一开创性发现从根本上明确了CML的致病因素，建立了精确的诊断性试验方法，发展了分子靶向治疗以及对治疗反应的分子学检测和微小残留病灶检测。2005年，在PV、ET和CIMF患者中发现的JAK2V617F有类似的前景，也为研发靶向治疗药物展现了光明的前景。因此，有人提出MPD的分类、诊断和治疗已进人JAK2V617F时代。 JAK2V617F，是一种累及JAK2酪氨酸激酶基因的功能获得性体细胞突变，为JAK2基因的假激酶结构域JH2的密码子617中，鸟嘌啉被胸腺嘧啶替代，导致缬氨酸被苯丙氨酸替代。2005年首次报道存在于CMPD疾病中，包括PV、ET和CIMF。随后被证实存在于其他髓系疾病，包括不典型CMPD、MDS和急性白血病细胞系如人红白血病细胞系(HEL )。JAK2V617F发生于几乎所有的PV患者，在ET和CIMF中约占50%，在不典型CMPD的某些亚型中占20%，在MDS或AML中比例低于3%，而CML中未检测出JAK2V617F突变。因此有理由将PV、ET和CIMF归类为一组独立的CMPD范畴(即经典的BCR/ABL阴性CMPD )，以此与CML、MDS和不典型CMPD相区分。 经多参数流式细胞仪检测，从PV患者中分选出造血干细胞(HSCs)、共同髓系祖细胞(CMPs) ，粒/巨噬细胞祖细胞(GMPs)和巨核细胞/红系祖细胞( MEPs )，然后对上述祖细胞进行JAK2V617F突变分析，结果上述各种干祖细胞系均可检测到，提示其起源于造血干/祖细胞水平，疾病累及髓系、红系和巨核系。ET和IMF患者中JAK2V617F是否同时存在 于造血于细胞和祖细胞，尚未阐明。 尽管近期在PV、ET和CIMF患者的分子病因学方面已经有了重要进展，对JAK-ATAT信号途径的分析可能发现额外的突变等位基因，但目前JAK2V617F在这些疾病中的发病机制仍不明确，对无JAK2突变的CMPD患者的遗传学基础尚不清楚。 JAK2V617F检测方法，主要有：常规DNR测序、焦磷酸测序、解离曲线分析、等位基因特异PCR及BsaXI限制性酶切分析等，但必须结合各种方法的敏感性来解释试验结果。例如，在一个早期报道中应用直接测序法(敏感度20%) PV患者JAK2V617F的阳性率为73%，而应用等位基因特异PCR方法(敏感度3%)后其阳性率增至97%。另一方面，过于敏感(敏感度<0.01%)的试验方法会导致假阳性结果，致使在健康人也会检测出非常低水平的JAK2V617F突变。总的来说，由于能检测突变等位基因负荷和监测治疗反应等优势，目前首选定量PCR方法。JAK2V617F发生于几乎所有的PV患者，其假阴性的主要原因为诊断的不精确和实验方法的敏感度低所致，其他一些假阴性的原因有突变检测的标本不理想和治疗对突变等位基因负荷的改变。与PV不同的是，JAK2V617F突变检测对于ET、 CIMF或其他CMPD的诊断，尚无明确的预后意义和缺乏诊断的特异性而受到限制。 其次，JAK2V217F突变可能通过JAK-STAT信号传导通路增强使红系祖细胞的细胞生存蛋白BCL-X过表达；也可能通过PI13K、MAPK信号传导通路使红系祖细胞中死亡受体诱导的细胞凋亡减少；促进造血细胞系的G1/S期转化，伴细胞周期蛋白D上调和抑制因子P27下调，增强造血细胞增殖；提高造血细胞对胰岛素样生长因子1(IGF-1)的敏感性，促进细胞增生和分化。有人对MPD家族成员进行JAK2V217F检测，部分JAK2V217F阳性的家族成员中，临床并不能诊断为PV ,ET或IMF，仅有内源性红系克隆形成。对JAK2V217F阴性的PV , ET及IMF患者进行EPOR、MPL及GCSFR测序分析，在MPL跨膜—近膜连接处发现色氨酸被亮氨酸替代的突变，即MPLW515L。 MPLW515L等位基因发生于10%的JAK2V617F阴性的MF患者，在ET患者中比例更低，而在PV患者中未检出。 MPLW515L突变同样可激活JAK-STAT、MAPK及PI13K信号传导，表达MPLW515L的受体小鼠造成的疾病模型和人类IMF十分相似，常伴血小板显著增多。 JAK2V617F及MPLW515L均阴性的MPD发病机制目前仍未阐明，可能还有其他的基因突变导致发病。此外，尚有一小部分患者，同时存在JAK2V617F及MPLW515L，二者在MPD的发病中是否有协同作用也不得而知。而ET和IMF的发生除JAK2V217F外，可能还需其他额外的遗传事件。 PV晚期进展为骨髓纤维化，或少数患者转化为白血病和JAK2V617F突变的关系尚无结论，多数意见认为并不相关。